刚地弓形虫GJS株微线体蛋白3基因真核表达质粒的构建及在BHK-21细胞中的表达

• 作者: 付宝权 张德林 张燕丽 曹丽艳 李文卉 王艳华 芦赘 苟惠天
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 刚地弓形虫 微线体蛋白3 基因克隆 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 125-129
• 页数: 5页
• 分类号: S852.723
• 字数: 4045字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.02.006

摘要

采用PCR技术从刚地弓形虫GJS株基因组DNA中扩增微线体蛋白3(MIC3)基因,并克隆到pMD18-T载体,经PCR、酶切及测序鉴定后,阳性重组质粒酶切并亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)后进行PCR、酶切及测序鉴定.将重组质粒转染BHK-21细胞.间接免疫荧光染色证明,质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达.Western-blot分析证实,细胞裂解液及上清样品中有1条约39.2 ku的条带,可被山羊抗刚地弓形虫超免疫血清所识别,大小与预测值相符.表明,真核表达质粒pcDNA3-MIC3中的MIC3基因在BHK-21细胞中获得表达且表达产物具有抗原性.