β-Smac基因的克隆及过表达对胃癌细胞SGC7901顺铂敏感性的影响

• 作者: 刘平 束永前 洪婷婷 葛红梅 陆明洁
• 来源期刊: 南京医科大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: β-Smac基因 胃癌细胞 细胞凋亡 化疗敏感性
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学研究
• 页码范围: 469-474,490
• 页数: 7页
• 分类号: R730.3
• 语种: 中文

摘要

目的:分离,克隆编码β-Smac的基因,观察胃癌细胞SGC7901中β-Smac基闪过表达对顺铂敏感性的影响.方法:从胃癌细胞株SGC7901扩增β-Smac的cDNA.构建含β-Smac基因cDNA的表达载体pcDNA3.1-β-Smac.将pcDNA3.1-β-Smac质粒转入SGC7901细胞;用RT-PCR、Western blot分别从核酸和蛋白水平检测外源基因的表达情况.选用顺铂(0、2、8、12 μg/ml)处理转染pcDNA3.1(对照组)或pcDNA3.1-β-Smac(实验组)48 h后的SGC7901细胞24 h,流式细胞仪分析细胞凋亡百分率.结果:成功构建了含β-Smac基闽的表达质粒,核酸序列分析显示克隆的β-Smac基因序列与GeneBank中登记的β-Smac基因序列100%同源,引入的Flag序列完全正确.同对照组比较,实验组转染24 h后,SGC7901细胞β-Smac mRNA水平明显增高,48 h后Western blot在β-Smac预期位置检测到Flag蛋白特异性条带.顺铂处理24 h后,仅2 μg/ml组显示出实验组和对照组细胞凋亡差异有显著性(P=0.009),而其余各组间均未显示有统计学差异.结论:成功构建含β-Smac基因序列的重组质粒并转染靶细胞,外源性β-Smac基因过表达后,未显示能显著提高人胃癌细胞株SGC7901对顺铂的敏感性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	束永前	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	35	169	6.0	13.0
2	刘平	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	17	5	2.0	2.0
3	陆明洁	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	6	2	1.0	1.0
4	洪婷婷	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	2	0	0.0	0.0
5	葛红梅	江苏省人民医院/南京医科大学第一附属医院	2	0	0.0	0.0