促红细胞生成素基因转染人脐血间充质干细胞治疗新生大鼠缺氧缺血性脑损伤初步研究

• 作者: 任榕娜 夏桂枝 洪新如 王水良 陈新民
• 来源期刊: 中华细胞与干细胞移植（电子版）
• 学科: 医学
• 关键词: 促红细胞生成素 间充质干细胞 人脐血 缺氧缺血性脑损伤 移植
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 页码范围: 33-37
• 页数: 5页
• 分类号: R722.12

摘要

目的探讨转染人促红细胞生成素（EPO）基因的人脐血间充质干细胞（MSCs）脑内移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）的治疗效果。方法采用密度梯度离心法从足月新生儿脐血中分离培养MSCs,流式细胞术（FCM）检测细胞表面抗原标记CD29、CD44、CD105、CD34、CD106和HLA-DR。将pcDNA3-EPO经脂质体介导转染人脐血MSCs,经G418筛选后获得稳定转染人EPO基因的人脐血MSCs,用RT-PCR、Western blot鉴定外源人EPO基因在人脐血MSCs中的表达。42只7d龄SD大鼠在建立HIBD模型后分为3组：空白对照组（A组,n=12）,未转染EPO基因的MSCs移植组（B组,n=12）,转染EPO基因的MSCs移植组（C组,n=18）,在建立HIBD模型后第3天经大脑左侧皮层进行细胞移植。细胞移植术后第7天将C组大鼠随机挑选6只处死后进行脑组织免疫化学检测,观察移植细胞在脑内的存活和迁移情况;于移植术后第1、7、14、21、28天对3组大鼠进行改良神经功能损害评分（mNSS）。结果从足月新生儿脐血中分离培养出MSCs,流式细胞仪检测结果为强表达CD29、CD44、CD105,不表达CD34、CD106、HLA-DR;RT-PCR、Western blot结果显示转染人EPO基因的人脐血MSCs体外能表达EPO;移植组大鼠脑组织免疫化学检测发现移植细胞在脑内能够存活,并以移植点为中心向周围迁移;mNSS结果为：C组大鼠于移植术后第14天开始mNSS即低于A组（P〈0.05or P〈0.01）,B组则于移植术后第21天开始低于A组（P〈0.05）;C组与B组比较,于移植术后第21、28天,C组低于B组（P〈0.05）。结论转染人EPO基因的人脐血MSCs脑内移植术后对新生大鼠HIBD具有较好的治疗作用。