土壤中生防菌粉红粘帚霉67-1的荧光定量PCR检测方法

• 作者: 张拥华 李世东 陶萌
• 来源期刊: 中国生物防治
• 学科: 农学
• 关键词: 粉红粘帚霉 土壤 快速检测 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 35-40
• 页数: 6页
• 分类号: S476.8
• 字数: 4670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1005-9261.2009.01.008

摘要

为了建立重要植病生防真菌粉红粘帚霉67-1菌株的荧光定量PCR检测方法,收集了目标菌株、粘帚霉属其它多个种及近缘木霉属的多个种等共18个菌株,并进行了ITS区测序.以200bp左右差异较大区段设计出探针和引物.该引物及探针能有效扩增目标菌株,而其它17株非目标菌株没有扩增,表明所设计的引物和探针具有高度特异性.以目标菌株的阳性克隆质粒作为标准物质,建立了标准曲线,相关系数为0.9989,且扩增效率较高(95.0%).经过土壤样品试验,得出标准曲线相关系数为0.9979,表明所建立的粘帚霉67-1菌株荧光定量PCR检测方法合理有效、快速实用,适合生态学研究的要求.