疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 周波 宋宁宁 李多川 郑艳
• 来源期刊: 菌物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 内含子 成熟蛋白 诱导 分泌表达 重组酶 最适反应温度 最适反应pH 热稳定
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 268-274
• 页数: 7页
• 分类号: Q94
• 语种: 中文

摘要

疏棉状嗜热丝孢菌Thermomyces lanuginosus可产生具有重要工业生产价值的脂肪酶.根据已报道的相应序列设计特异引物,综合运用PCR、RT-PCR技术克隆到脂肪酶基因的全长DNA和cDNA序列.其中DNA序列长1071bp,包含876bp的开放阅读框以及3段内含子;cDNA序列长885bp.结构基因编码蛋白包含292个氨基酸,前17个氨基酸构成信号肽.序列提交GenBank,登录号分别为EU022703和EU370914.将脂肪酶基因cDNA序列的开放阅读框克隆到酵母分泌型表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母GS115得到重组子且实现了分泌表达.将重组子诱导产酶,在培养温度30℃、甲醇添加量1%的情况下,小规模发酵量达0.93mg/mL,其分泌表达的最高酶活为7.2U/mL.重组酶最适反应温度和pH分别是60℃和8.0.表达蛋白在60℃保温1h后仍有完全酶活,具有较高的热稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周波	山东农业大学微生物系	53	861	12.0	28.0
2	李多川	山东农业大学微生物系	73	827	17.0	23.0
3	郑艳	山东农业大学微生物系	1	12	1.0	1.0
4	宋宁宁	山东农业大学微生物系	1	12	1.0	1.0