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摘要:
目的:构建针对人膜联蛋白A2(ANX A2)的RNA干扰(RNAi)慢病毒表达载体,转染THP-1细胞,探讨ANX A2在抗磷脂抗体(APL)诱导单核细胞组织因子(TF)表达中的作用.方法:设计4条ANX A2特异性RNAi的寡核苷酸序列,与慢病毒载体pGCSIL-GFP连接,PCR及测序鉴定正确后,Western蛋白印迹法筛选出有效干扰序列.包装293T细胞获得重组慢病毒LV-RNAi-ANX A2,感染单核细胞株THP-1,观察细胞ANX A2 mRNA和蛋白表达下降程度.再用APL/β_2GPI复合物刺激干扰后的THP-1细胞,观察TF mRNA表达及TF活性变化.结果:成功构建RNAi慢病毒载体并筛选出有效干扰片段;包装293T细胞后病毒滴度为3×10~(12)TU/L;感染THP-1后细胞ANX A2 mRNA和蛋白均被沉默.APL/β_2GPI复合物刺激干扰后的THP-1细胞,其TF表达下降至基础水平.结论:构建的慢病毒表达载体能显著抑制THP-1细胞ANX A2的表达,进而影响APL诱导的TF表达,证明ANX A2在APL诱导的单核细胞表达TF过程中具有重要作用.
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文献信息
篇名 ANX A2在抗磷脂抗体诱导THP-1细胞组织因子表达中的作用
来源期刊 中国病理生理杂志 学科 医学
关键词 RNA干扰 慢病毒载体 膜联蛋白A2 抗磷脂抗体 组织因子
年,卷(期) 2009,(12) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 2447-2453
页数 7页 分类号 R593.2
字数 6535字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.12.032
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 周红 江苏大学基础医学与医学技术学院 100 413 11.0 15.0
2 李娜 江苏大学基础医学与医学技术学院 29 163 7.0 12.0
3 俞颖 15 124 5.0 11.0
4 王婷 江苏大学基础医学与医学技术学院 50 209 8.0 11.0
5 黄宏亮 江苏大学基础医学与医学技术学院 5 34 4.0 5.0
6 石文霞 江苏大学基础医学与医学技术学院 7 47 5.0 6.0
7 王海波 江苏大学基础医学与医学技术学院 15 63 5.0 7.0
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研究主题发展历程
节点文献
RNA干扰
慢病毒载体
膜联蛋白A2
抗磷脂抗体
组织因子
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国病理生理杂志
月刊
1000-4718
44-1187/R
大16开
广东省广州市黄埔大道西601号
46-98
1985
chi
出版文献量(篇)
11461
总下载数(次)
3
总被引数(次)
84945
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
浙江省自然科学基金
英文译名:
官方网址:http://www.zjnsf.net/
项目类型:一般项目
学科类型:
论文1v1指导