摘要:
抗缪勒氏管激素(antii-MulleriaIl hormone,AMH),也称缪勒氏管抑制物质(mullerian inhibiting substance,MIS),为肽类生长因子,属于TGF-β生长和分化因子家族.应用RT-PCR和RACE法,从奥利亚罗非鱼精巢组织中分离出AMH的cDNA.分离到3'UTR长为621 bp和168 bp的两条cDNA,除了长度不一,两者之问只存在两个碱基的差别.5'UTR为27 bp,阅读框为1 545 bp,翻译成514个氨基酸,其中,AMH-N域237个氨基酸,TGF-B域93个氨基酸.同源性分析显示,AMH保守性偏低,奥利亚罗非鱼与其它鱼类的相似性为32%~60%,与哺乳类动物只有19%~21,而TGF-β域的保守性相对较高,与其它鱼类的相似性为54%~72%.基因结构分析显示,奥利亚罗非鱼AMH存在6个内含子,和斑马鱼AMH结构相似,和人、鼠AMH有较大差别,它们缺少奥利亚罗非鱼和斑马鱼AMH基因共有的内含子Ⅰ和Ⅵ.然而,启动子转录因子分析结果表明,奥利亚罗非鱼AMH启动子中也存在SRY,SF-1,GATA-4,Sox5,Sox9等结合位点.使用Traqman探针分析奥利亚罗非鱼AMH在成鱼不同组织中的表达以及鱼苗、鱼种、成鱼性腺中的表达量,结果显示AMH在成鱼的卵巢、精巢中均有表达,而在脑、肝、肌肉以及心脏中不表达.AMH日在鱼苗性腺中不表达,在鱼种、成鱼中雄鱼AMH表达量显著高于雌鱼,而鱼种雄鱼AMH表达量是成鱼雄鱼的10倍.