异育银鲫肝微粒体体外恩诺沙星 N-脱乙基酶酶促反应动力学初步研究

• 作者: WANG Kai-yu 房文红 汪开毓 胡晓 贾娴
• 来源期刊: 海洋渔业
• 学科: 农学
• 关键词: 异育银鲫 肝微粒体 酶促反应动力学 恩诺沙星N-脱乙基酶
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 161-166
• 页数: 6页
• 分类号: S948
• 字数: 3600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-2490.2009.02.008

摘要

建立了异育银鲫肝微粒体体外孵育恩诺沙星(enrofloxacin, EF)的酶促反应体系,应用RP-HPLC法检测其主要代谢产物环丙沙星(ciprofloxacin, CF),以间接反映恩诺沙星N-脱乙基酶的活性.采用二氯甲烷提取、正已烷去脂提取有效成分,样品回收率均大于81.4%,含CF或EF的肝微粒体样品能在4 ℃下稳定至少72 h,日内变异系数不超过3.51%,日间变异系数不超过3.71%,EF和CF准确度分别小于8.1%、6.5%,检测限(信超比为3)分别为0.15 μmol/L、0.3 μmol/L.恩诺沙星在银鲫肝微粒体中代谢符合一级消除方程C=140e-0.072 t,消除速率常数(K)为0.072 /h,消除半衰期(T 1/2)为9.627 h.用Origin Lab软件的Hyperbl模型进行拟和,以方程y = P1·x/ (P2 + x)表示米氏常数V max、Km两者的关系,求得V max为0.260 2±0.014 7 nmol/mg·min,Km为53.898 5±10.225 7 μmol/L,内在清除率(C l int)约为0.004 8 mL/(min·mg).恩诺沙星消除率和环丙沙星转化率的研究结果提示,恩诺沙星在银鲫肝微粒体中的代谢以N-脱乙基反应为主,提示可能还通过其它途径生成另外代谢产物.而酶动力学研究数据(V max,C l int值)表明,恩诺沙星 N-脱乙基酶与底物结合力不强,酶促反应强度处于中等水平.据此,笔者推测恩诺沙星在银鲫肝微粒体中的代谢速度较为缓慢.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪开毓	四川农业大学动物医学学院	270	2400	27.0	35.0
2	房文红	中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业重点开放实验室	55	657	14.0	24.0
3	胡晓	中国水产科学研究院东海水产研究所农业部海洋与河口渔业重点开放实验室	11	7	2.0	2.0
4	贾娴	四川农业大学动物医学学院	3	7	2.0	2.0