人FUT3基因真核表达载体的构建与表达

• 作者: 刘吉成 岳丽玲 樊丽
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: α 1 3-岩藻糖基转移酶Ⅲ 增强型绿色荧光蛋白 基因克隆
• 年，卷（期）: 2009,（31）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3210-3213
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3949字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2009.31.005

摘要

目的:构建增强型绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-C1-FUT3真核表达载体,分析其在细胞系MDA-MB-231中的表达.方法:采用RT-PCR扩增FUT3全长基因片段,克隆至pMD18-T载体进行测序分析,将FUT3亚克隆至pEGFP-C1表达载体并酶切鉴定.利用脂质体将重组真核表达栽体pEGFP-C1-FUT3转染入人乳腺癌细胞MDA-MB-231中,经G418筛选获得稳定转染的细胞系,荧光显微镜观察及RT-PCR检测FUT3的表选.结果:成功获得人全长FUT3基因并构建了真核表达栽体pEGFP-C1-FUT3,体外转染MDA-MB-231细胞后荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白的表达,半定量RT-PCR检出高水平表达的FUT3.结论:成功构建了增强型绿色荧光蛋白为报告基因的FUT3真核表达载体,并在MDA-MB-231中稳定表达,为进一步研究FUT3的生物学功能提供基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘吉成	齐齐哈尔医学院医药科学研究所	124	976	18.0	26.0
2	岳丽玲	齐齐哈尔医学院医药科学研究所	53	261	10.0	14.0
4	樊丽	齐齐哈尔医学院医药科学研究所	30	35	4.0	5.0