扩展青霉脂肪酶K56R叠加突变对热稳定性的影响

• 作者: 施文芳 林琳 沈麟 胡长浩
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 扩展青霉脂肪酶 叠加突变 热稳定性
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2967字
• 语种: 中文

摘要

目的:扩展青霉脂肪酶随机突变体ep8是一株热稳定性比野生型有所提高的突变体.获得热稳定性提高的优良菌株.方法:在ep8的基础上利用重叠延伸PCR构建叠加突变重组质粒pPIC3.5K-ep8一K56R,将该质粒电转毕赤酵母(Pichia paaoris)GS115进行异源表达.结果:该叠加突变脂肪酶在毕赤酵母中获得了活性表达.15%SDS-PACE结果分析表明突变脂肪酶PEL-ep8-K56R-GS分子量与野生型PEL-GS一致,约为28kDa.叠加突变脂肪酶在37℃时酶活为852U/mL、野生型为760u/mL、随机突变体为824u/mL,叠加突变体酶活相比野生型提高了21.1%,相比随机突变体提高了3.4%.热稳定性分析数据表明叠加突变脂肪酶Tm值为40.1℃、野生型为38.7℃、随机突变体为39.9℃,Tm值相比野生型提高了1.4℃,相比随机突变体提高了0.2℃.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林琳	福建师范大学生命科学学院	57	272	10.0	14.0
2	施文芳	福建师范大学生命科学学院	4	28	3.0	4.0
3	胡长浩	福建师范大学生命科学学院	6	28	3.0	5.0
4	沈麟	福建师范大学生命科学学院	3	21	2.0	3.0