东海原甲藻线粒体细胞色素b(Cytb)基因的定量检测

• 作者: 于志刚 甄毓 米铁柱 赵丽媛
• 来源期刊: 中国海洋大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 线粒体细胞色素b基因 东海原甲藻 实时荧光定量PCR 内参基因
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 技术报告
• 页码范围: 448-452
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 字数: 4592字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5174.2009.03.029

摘要

建立了检测东海原甲藻线粒体细胞色素b(Cytb)基因mRNA含量的实时荧光定量PCR方法.以甲藻Cytb基因的简并引物扩增得到984 bp长的东海原甲藻Cytb基因片段,经克隆、测序,制备并纯化质粒.以光度法测定质粒浓度并作为标准品.对上述基因片段,利用PRIMER EXPRESS 3.0 设计引物,以梯度稀释的质粒标准品进行定量PCR反应,以SYBR Green I为荧光染料,制作标准曲线,得到基因拷贝数X与Ct值的关系为:Ct=-3.50 lg X+39.35(相关系数r为0.999).通过对不同生长时期的东海原甲藻样品的Cytb基因mRNA含量检测,发现该基因的表达量较稳定,平均值为(45.4±4.7)拷贝/细胞,受生长状态影响不大,可作为实时荧光定量PCR的内参基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于志刚	中国海洋大学海洋化学理论与工程技术教育部重点实验室	75	1505	23.0	35.0
2	米铁柱	中国海洋大学环境与生态教育部重点实验室	45	731	16.0	26.0
3	甄毓	中国海洋大学环境与生态教育部重点实验室	26	219	9.0	14.0
4	赵丽媛	中国海洋大学海洋生命学院	1	13	1.0	1.0