含PGK启动子慢病毒表达质粒的构建与鉴定

• 作者: 刘楠乔 周军智 李建国 王根林 蔡亚非 邹永康
• 来源期刊: 安徽师范大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: PGK启动子 慢病毒载体 基因表达
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 163-167
• 页数: 5页
• 分类号: Q331
• 字数: 3835字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2443.2009.02.015

摘要

为了构建一个含有人源PGK1(human phosphoglycerate kinase 1)启动子的慢病毒表达载体 pL-PGK-GFP.采用PCR从人组织中扩增PGK1基因的启动子部分,再用酶切-连接的方法将扩增的启动子区片段亚克隆入慢病毒表达质粒pL-EGFP中,再用测序、酶切和瞬时表达的方法进行鉴定.结果是下游的eGFP基因在PGK1启动子驱动下,在293FT细胞中表达绿色荧光蛋白报告基因,这表明成功构建了慢病毒表达质粒pL-PGK-GFP.扩增的537bp PGK1启动子片段具有一定的启动效率,能在HIV来源的慢病毒载体中驱动下游目的基因的表达.