溴氰菊酯酶联免疫吸附分析方法研究

• 作者: 张帮红 施海燕 王鸣华
• 来源期刊: 农药学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 溴氰菊酯 酶联免疫吸附分析 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 261-268
• 页数: 8页
• 分类号: R392.11|S482.3
• 字数: 5876字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-7303.2009.02.020

摘要

建立了定量测定溴氰菊酯间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA).合成了半抗原1-羧基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(Med)和N-2-(羧基丙基)氨基甲酰基-(3'-苯氧基苯基)甲基-3-(2',2'-二溴乙烯基)-2,2-二甲基环丙基羧酸酯(Di).分别采用碳二亚胺法和混合酸酐法将半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备了免疫原Di-BSA和包被原Di-OVA、Med-OVA.将制得的溴氰菊酯免疫原免疫动物获得多克隆抗体,经间接非竞争ELISA法测得其效价为2.5×105.通过对甲醇含量、离子强度、pH值等影响因素进行异源分析条件的优化,确立了溴氰菊酯间接竞争酶联免疫分析方法的最佳检测条件(30%甲醇、氯化钠0.4 mol/L、pH 7.5),并建立了标准竞争曲线.该方法的IC50值为0.55±0.05 mg/L,检测限(IC10)为3.76±0.35μg/L,对大多数拟除虫菊酯无交叉反应.分别在自来水、河水和土壤样品中添加0.05～5.0 mg/L(或mg/kg)的溴氰菊酯,回收率分别为89.7%～106.8%、82.4%～101.7%、75.6%～97.8%.