凡纳滨对虾精氨酸激酶的多克隆抗体制备及组织特异性表达分析

• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 凡纳滨对虾 精氨酸激酶 多克隆抗体 组织表达
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 页码范围: 1026-1030
• 页数: 5页
• 分类号: Q785|S917
• 语种: 中文

摘要

精氨酸激酶(arginine kinase,AK)在调节无脊椎动物磷酸精氨酸与ATP之间能量平衡的过程中具有重要作用.在前期工作基础上,设计特异引物,以凡纳滨对虾肌肉组织cDNA为模版,克隆得到了1071 bp的凡纳滨对虾精氨酸激酶的完整开放阅读框;将它克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上,转化BL21(DE3)菌株,经诱导后表达出GST-AK融合蛋白.以纯化的融合蛋白作为抗原免疫小鼠,制备多克隆抗血清,经检测该抗原与抗体识别良好.利用得到的抗体对凡纳滨对虾AK在蛋白质水平上的特异性表达进行分析发现,精氨酸激酶在对虾的肌肉、心脏、神经、血细胞和胃组织中具有高的表达量,而在眼柄、肝胰腺、鳃和皮肤组织中表达量较低.为进一步研究精氨酸激酶在对虾体内的功能奠定了基础.