小鼠ES细胞条件培养基对绵羊类胚胎干细胞克隆、传代的影响

• 作者: 和小娥 张静芳 王新庄 白昌明 闫颖颖
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊类ES细胞 小鼠ES细胞条件培养基 自我更新
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1327-1332
• 页数: 6页
• 分类号: S814|Q813.11
• 字数: 5017字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2009.09.008

摘要

本研究以无血清培养基为基础培养液,旨在探求小鼠ES细胞条件培养液(ESCCM)和2种不同饲养层对绵羊类ES细胞分离、克隆效率的影响.绵羊内细胞团从胚胎中分离得到后,分别以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)和绵羊胎儿成纤维细胞(SEF)为饲养层进行培养.结果在MEF饲养层上,绵羊类ES细胞在ESCCM新培养系统中可稳定传至第10代,而使用基础培养液最多传至5代.而在SEF饲养层上,绵羊类ES细胞在ESCCM新培养系统中仅能传至3代.表明使用ESCCM和MEF能促进绵羊类ES细胞的分离和克隆.对类ES细胞进行核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的类ES细胞符合ES细胞的主要特征,而且发现这些类ES细胞可以表达胚胎干细胞关键转录因子Nanog.结果表明,ESCCM可显著提高绵羊类ES细胞的分离克隆效率,原因可能是小鼠ES细胞在生长过程中可能分泌某些重要的细胞因子,从而达到促进绵羊ES细胞增殖的作用.且MEF比SEF更适合于绵羊类ES细胞的分离和传代.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王新庄	河南农业大学牧医工程学院	53	175	7.0	9.0
2	闫颖颖	西北农林科技大学动物医学院	4	11	3.0	3.0
3	张静芳	西北农林科技大学动物医学院	4	14	3.0	3.0
4	和小娥	河南农业大学牧医工程学院	8	35	4.0	5.0
5	白昌明	河南农业大学牧医工程学院	1	3	1.0	1.0