RNAi抑制Wnt1信号通路对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖抑制的实验研究

• 作者: 吕志葆 张立洪 李凯 肖现民 郑继翠
• 来源期刊: 中华小儿外科杂志
• 关键词: 神经母细胞瘤 SH-SY5Y Wnt1蛋白质 siRNA β-catenin
• 年，卷（期）: 2009,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 626-629
• 页数: 4页
• 字数: 3014字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-3006.2009.09.013

摘要

目的 检测人神经母细胞瘤细胞株SH-SYSY中Wnt1的表达情况,并通过抑制Wnt1基因的表达来干预Wnt1信号通路,观察其对神经母细胞瘤增殖的影响,阐明Wnt1信号通路与神经母细胞瘤之间的相关性.方法 检测人神绛母细胞瘤株SH-SY5Y中Wnt1在基因和蛋白水平的表达及细胞内定位情况;将SH-SY5Y细胞分为四组,分别是阴性对照组、空白载体组、非特异性siRNA组和Wnt1-siRNA组.用针对Wnt1的特异性siRNA阻断该细胞中Wnt1信号通路的传递,分别检测上述四组细胞中Wnt信号通路中Wnt1及β-catenin浓度的变化;显微镜下观察细胞形态、数量的改变;用MTT方法检测肿瘤细胞增殖情况.结果 SH-SY5Y中的Wnt1在mRNA转录水平以及蛋白水平均有表达,且位于细胞浆内.采用Wnt1的特异性siRNA技术干预细胞后,Wnt1特异性siR-NA干预组中Wnt1蛋白的表达较阴性对照组、空白载体组及非特异性siRNA组明显下降(P<0.01),其下游通路中的关键蛋白β-catenin的表达同样明显下降(P<0.01);光学显微镜下发现特异性干预组中细胞明显较其他三组少,死亡漂浮的细胞较多,细胞突触减少;MTT结果提示,Wnt1基因表达被抑制后,SH-SY5Y细胞的增殖率明显下降(P<0.01).结论 Wnt1在人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y中呈阳性表达;阻断Wnt1信号通路可以抑制人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y的增殖.Wnt1信号通路可能是影响神经母细胞瘤增殖的重要通路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李凯	复旦大学附属儿科医院外科	91	312	10.0	13.0
2	张立洪	复旦大学附属儿科医院外科	5	23	2.0	4.0
3	吕志葆	复旦大学附属儿科医院外科	41	176	8.0	10.0
4	肖现民	复旦大学附属儿科医院外科	176	823	13.0	19.0
5	郑继翠	复旦大学附属儿科医院外科	55	103	7.0	9.0