香烟提取物对支气管哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响

• 作者: 倪望 刘先胜 张晓宇 张珍祥 徐永健 陈仕新
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 香烟提取物 哮喘 气道平滑肌细胞 细胞周期蛋白D1
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1969-1974
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 5080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2009.10.021

摘要

目的: 探讨香烟提取物(CSE)对支气管哮喘(简称哮喘)大鼠气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖作用及可能机制.方法: 16只SD大鼠随机分为对照组和哮喘组,各8只.原代培养大鼠ASMCs,取第3-6代细胞,分为对照组、对照+CSE组、哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+嘧啶基-苯磺酰胺(GW8510,细胞周期蛋白依赖激酶-4抑制剂)组、哮喘+GW8510组.用流式细胞术、四甲基偶氮唑盐(MTT)法及增殖细胞核抗原(PCNA)免疫细胞化学技术检测ASMCs增殖;用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹(Western blotting)检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果: (1)哮喘组ASMCs与对照组ASMCs相比,在S+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA表达率上明显增高,差异显著(P＜0.01).(2)哮喘组ASMCs S+G2/M期比例、吸光度(A)值和PCNA表达率分别为(18.30±1.12)%、0.512±0.110、(55.1±3.7)%;哮喘+CSE组分别为(32.12±1.17)%、0.801±0.210、(90.2±7.3)%;哮喘+CSE+GW8510组分别为(17.21±0.95)%、0.508±0.009、(54.3±4.8)%;哮喘+GW8510组分别为(11.16±1.48)%、0.345±0.078、(40.6±5.4)%.除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著(P＜0.01).(3)哮喘组、哮喘+CSE组、哮喘+CSE+GW8510组、哮喘+GW8510组ASMCs cyclin D1 mRNA A值比值和蛋白表达A值比值分别为0.236±0.045、0.271±0.002;0.369±0.124、0.379±0.002;0.231±0.075、0.261±0.002;0.165±0.064、0.193±0.002.除哮喘组、哮喘+CSE+GW8510组两组比较差异无显著外,其余两两比较差异均显著(P＜0.01).结论: 正常与哮喘大鼠ASMCs在CSE干预后增殖明显加快,cyclin D1表达明显增加.CSE可能是通过cyclin D1参与调控哮喘大鼠ASMCs的增殖.