草莓果实外源基因瞬时表达系统的建立

• 作者: 刘敏 晁慧娟 李凤岚 滕文静 董清华 邱德有
• 来源期刊: 果树学报
• 学科: 农学
• 关键词: 草莓 果实 瞬时表达 根癌农杆菌 基因功能
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 60-65,封4
• 页数: 7页
• 分类号: S668.4
• 语种: 中文

摘要

将东北红豆杉紫杉烷13α-羟基化酶(Taxane 13α-hydroxylase,13OH)基因全长cDNA正向插入到pCAMBIA1304.构建其植物表达载体pCT130H;将水稻小RNA 169d(microRNA 169d,miRNA 169d)基因前体(precursor):全长DNA正向插入到pCAMB1A1305.1,构建其植物表达载体pCO169d.用电击法把它们导人根癌农杆菌GV3101,获得有关工程菌株.用1 mL无菌注射器分别将这2种工程农杆菌悬浮液注射到草莓(Fragaria×ananassa)授粉后1周、2周、3周的果实中,发现授粉后2周果实适宜注射,可用于瞬时表达.对授粉后2周的果实进行不同注射部位、根癌农杆菌不同活化时期和根癌农杆菌悬浮液不同注射量试验,以蒂部注射、根癌农杆菌活化12 h和0.5 mL悬浮液注射量的效果最好,与结构基因130H和调节基因miRNA 169d相融合的GUS基因都得到表达,瞬时表达成功.