信号转导及转录活化因子基因(stat3)转染牛乳腺上皮细胞及生物学特性观察

• 作者: 何玉龙 刘甲 吕品 孙健红 张涌
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 信号转导及转录活化因子(star3)基因 牛乳腺上皮细胞 转染 生物学特性
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 426-432
• 页数: 7页
• 分类号: S188
• 字数: 4936字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2009.03.012

摘要

应用PCR技术从含有人信号转导及转录活化因子(star3)基因cDNA的质粒pOTa7中扩增star3基因片段.将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中.构建重组表达质粒.利用脂质体介导法将重组表达质粒转染原代牛乳腺上皮细胞(bovinemammary epithelial cells).G418筛选阳性克隆.RT-PCR检测star3基因在牛乳腺上皮细胞中的表达,并通过流式细胞术(flowcytometry)检测转染细胞的增殖能力、周期以及DNA含量.结果表明.转染24 h后大约16%的细胞被导入含star3基因的重组表达质粒.在mRNA水平证实细胞内有stat3基因的高表达.导人star3基因后,细胞增殖能力增强,染色体变为三倍体,细胞的增殖寿命较对照细胞延长了13代.表明导入star3基因能延长体外培养的牛乳腺上皮细胞的寿命.