山麻鸭睾丸和肝脏中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离提取及其性质的比较

• 作者: 刘建昌 王长康 艾启青 黄小红
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 山麻鸭 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶 性质
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 49-54
• 页数: 6页
• 分类号: Q556+.2|S834+.83
• 语种: 中文

摘要

山麻鸭的睾丸和肝脏经硫酸铵分级沉淀分离、DEAE-32离子交换柱层析,获得的肝脏N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase,EC3.2.1.52)比活力为85.30 U·mg-1,纯化倍数为10.48.睾丸NAGase再进一步通过Sephacryl S-300凝胶过滤纯化,获得的NAGase比活力为5537.00 U·mg-1,纯化倍数为59.20.睾丸NAGase经聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳,出现单一蛋白带,测定等电点pI为5.05.以对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(pNP-NAG)为底物研究酶催化底物水解的反应动力学.结果表明:山麻鸭睾丸和肝脏NAGase的最适pH分别为5.70和5.60,酶在pH为3.00-8.43时较稳定,而pH>8.43时很快失活;酶的最适温度分别为45和60 ℃,当温度为80 ℃时酶完全失活.睾丸NAGase在40 ℃下处理30 min,酶活力保持稳定;而肝脏NAGase在30 ℃下处理30 min,酶活力保持稳定,酶催化pNP-NAG水解反应遵循米氏方程,睾丸和肝脏NAGase水解pNP-NAG的Km分别为0.17和0.21 mmol·L-1,Vm分别为8.82和7.25 μmol·L-1·min-1,活化能分别为57.57和79.47 kJ·mol-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王长康	福建农林大学动物科学学院	77	907	16.0	26.0
2	黄小红	福建农林大学动物科学学院	58	436	12.0	18.0
3	艾启青	福建农林大学动物科学学院	2	6	1.0	2.0
4	刘建昌	福建农林大学动物科学学院	7	91	6.0	7.0