粒细胞集落刺激因子促进骨髓源间充质干细胞活性的机制

• 作者: 刘岐焕 唐俊明 孔霞 曾琴兵 王家宁 程范军 郭凌郧 陈龙
• 来源期刊: 生理学报
• 学科: 医学
• 关键词: 粒细胞集落刺激因子 间充质干细胞 蛋白激酶C
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 169-174
• 页数: 6页
• 分类号: R329
• 语种: 中文

摘要

本文旨在探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)促进骨髓间充质干细胞(mesenchymalstem cells,MSCs)活性的机制.采用经典的全骨髓贴壁法培养MSCs,通过成骨、成脂肪等多向诱导分化以及流式细胞仪分析其表面标记(CD133、CD34、CD90、CD105)等鉴定MSCs特征;以第三代MSCs为实验材料,采用MTT法分析G-CSF(20 μg/mL)对MSCs活性的影响.随后以50 nmol/L wortmannin(磷酰肌醇-3激酶阻断剂)、50μmol/L PD98059(细胞外信号调节激酶阻断剂)、30 μmol/L SB203580(丝裂原活化蛋白激酶阻断剂)、10μmol/L H89[蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)抑制剂]、20 μmol/L Y27632(Rho激酶特异抑制剂)、1 μmol/L rapamycin[雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)特异性阻断剂]、10 mmol/L straurosporine[蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)阻断剂]、6 nmol/L G0697(PKCα抑制剂)、50μmol/L Pseudo Z(PKCら抑制剂)等分别处理MSCs,观察G-CSF影响MSCs活性的信号机制.结果显示,培养的第三代MSCs旱现出CD90、CD105强阳性,具有成骨、成脂肪等多向分化能力;G-CSF促进MSCs活性,H89、Y27632、Pseudo Z不能抑制G-CSF对MSCs的激活作用,wortmannin、rapamycin、PD98059、SB203580、G0697部分抑制G-CSF对MSCs的激活作用,straurosporine可完全抑制G-CSF对MSCs的激活作用.以上结果提示,G-CSF激活MSCs效应与AKT-mTOR-PKC途径密切相关,且PKC处于中心环节.