猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因的克隆及杆状病毒表达载体的构建

• 作者: 何生虎 刘湘涛 吴锦艳 尚佑军 满自萍 田宏 赵娜
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因 克隆 杆状病毒表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 页码范围: 83-86
• 页数: 4页
• 分类号: S432.4+1
• 字数: 3120字
• 语种: 中文

摘要

根据猪繁殖与呼吸综合症病毒已知序列(ch-1a,AY032626)设计包含完整ORF5序列的1对引物,采用RT-PCR方法扩增PRRSV甘肃LZH株的ORF5基因,将其克隆到杆状病毒载体pFastBacHTA上,经酶切鉴定、PCR鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBacHTA-ORF5,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBacHTA-ORF5转化到DH10Bac感受态细胞中,与Bacmid发生位点特异性转座作用,获得重组转座子rBacmid-ORF5;并成功构建了PRRSV LZH株ORF5基因的杆状病毒载体,为基因工程疫苗的研制奠定了基础.