适合AFLP分析用的节瓜基因组DNA提取方法的研究

• 作者: 于远 林毓娥 梁肇均 王瑞 程志学 陈清华 黄河勋
• 来源期刊: 分子植物育种
• 学科: 农学
• 关键词: 节瓜 DNA提取 CTAB法 AFLP
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 新思路、新技术、新方法
• 页码范围: 420-424
• 页数: 5页
• 分类号: S6
• 字数: 3491字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-416X.2009.02.033

摘要

本研究以CTAB法为基础,采用以下5种处理提取节瓜叶片基因组DNA:A、PVPP(3%)+抗坏血酸(100 mmol/L);B、β-巯基乙醇(3%)+抗坏血酸(100 mmol/L):C、PVPP(3%)+半胱氨酸(5%);D、PVPP(3%)+β-巯基乙醇(3%);E、抗坏血酸(100 mmol/L)+半胱氨酸(5%).实验结果表明:在5种处理中,C处理提取的DNA质量最高,其溶液呈无色透明状,经核酸蛋白仪测定其OD260/OD280为1.8～2.0;经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,节瓜叶片基因组DNA带型清晰、完整、无降解,蛋白、多糖、酚类及RNA等去除比较彻底;经AFLP分析,酶切彻底,PCR扩增后的带型清晰稳定,重复性好,说明C处理提取的节瓜基因组DNA完全满足AFLP分析的要求.