Asia 1 型口蹄疫病毒多表位基因的设计及其在毕赤酵母中的表达

• 作者: 田明尧 胡博 郑敏 金宁一 金扩世 霍晓伟 韩松 鲁会军
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: Asia1型口蹄疫病毒 多表位基因 分子设计 毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 11-15
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6|Q786
• 字数: 4126字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.01.003

摘要

为制备Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)特异性诊断抗原,根据国内Asia 1型FMDV流行毒株的序列,合成了2个FMDV流行毒株VPl基因的5个抗原表位.采用Insight Ⅱ软件进行蛋白空间构象模拟,证实设计的多表位分子结构符合要求.将合成的多表位基因按设计的酶切位点进行酶切连接,构建了Asia 1型FMDV VP1双拷贝基因重组质粒(pMD18-dVP1Asia).从该重组质粒获得dVP1Asia基因,与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了重组表达质粒pPIC9K-dVP1Asia.用BglⅡ将重组表达质粒线性化后,转化GS115酵母菌.经筛选、鉴定,成功获得了表达FMDV多表位VP1蛋白的阳性重组酵母茵.该阳性重组酵母茵经甲醇诱导,在培养液上清中可检测到目的蛋白.Western-blot结果显示,该蛋白能特异识别Asia 1型FMDV抗体,且具有很好的反应原性.