死亡相关蛋白激酶基因启动子甲基化特异性PCR法的建立与初步应用

• 作者: 吴朝阳 姚冬明 朱照辉 林江 王雅丽 肖高飞 蒋鹏程 许文荣 钱军 钱震
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 死亡相关蛋白激酶 甲基化特异性PCR 甲基化
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 23-26
• 页数: 4页
• 分类号: Q5
• 字数: 2899字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2009.01.013

摘要

目的:建立甲基化特异性PCR(MSP)技术检测死亡相关蛋白激酶(DAPK)基因启动子甲基化.方法:设计针对DAPK基冈启动子的MSP引物,建立MSP检测体系对甲基化阳性模板进行检测,评价其特异性、重复性和灵敏性,并经测序鉴定.结果:所建市的甲基化MSP方法仅能扩增出甲基化阳性模板.不能扩增出未甲基化阳性模板和未硫化处理的DNA模板;对不同梯度稀释的甲基化阳性模板进行检测,其最大敏感性可达2%;在不同时间进行甲基化MSP检测的结果均一致.结论:成功建立的DAPK基因启动子甲基化MSP检测方法具有良好的特异性、灵敏性和重复性,可用于肿瘤标本的批量检测.