摘要:
背景:近年来反复冻融处理技术作为一种同种异体肌腱的保存处理方法,主要原理是反复利用0~-60℃腱细胞最易损伤的冷冻温度,使得肌腱内细胞无活性,从而降低免疫原性.目的:拟观察反复冻融处理对同种异体移植兔跟腱组织学和生物力学的影响.设计、时间及地点:组织形态学及生物力学水平的对照动物实验,于2007-10/2008-02在北京大学运动医学研究所实验室完成.材料:选用17只成年健康新西兰大白兔.方法:无菌条件下取兔跟腱并带0.6 cm×0.4 cm跟骨骨块,按照组织库程序行60Co照射68 min,照射剂量为25 kGy.分为3组,-80 ℃冷冻,室温融解,反复冻融次数分别是1,3和10次,每组又抽取7条肌腱作生物力学测定,4条作组织学观察.主要观察指标:取肌腱行苏木精-伊红染色、胶原Van Gieson染色和透射电镜扫描,观察跟腱组织形态学改变,并进行跟腱拉伸实验以观察生物力学变化.结果:组织学观察发现,随着反复冻融次数的增加,腱束和胶原纤维捧列变得混乱直至断裂,细胞崩解,并且由于冰晶形成造成明显的腱束间裂隙.生物力学方面,与冻融1次组比较,冻融3,10次组的最大载荷、最大载荷能量及最大应力均显著降低(P<0.05),其他指标如弹性模量、能量密度也有下降但不明显.结论:反复冻融处理肌腱是一种有创的处理方法,正如组织学表现的可以引起细胞崩解、腱纤维紊乱甚至断裂等,最终会导致其生物力学水平的下降.