腺病毒载体介导的可调控鼠白细胞介素12基因对大肠癌小鼠的治疗效果

• 作者: 刘绪舜 方国恩 王峰 苏长青 薛绪潮 钱其军 陈坚
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因调控网络 白细胞介素12 结肠肿瘤 小鼠 腺病毒载体
• 年，卷（期）: 2009,（20）
• 所属期刊栏目: 大肠癌诊治
• 页码范围: 1372-1376
• 页数: 5页
• 分类号: R9
• 字数: 4283字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2009.20.003

摘要

目的 构建携带鼠白细胞介素(mIL)12基因并可经RU486诱导表达的重组腺病毒载体,研究其对小鼠大肠癌移植瘤的治疗效果及安全性.方法 将穿梭质粒pDC-RUmIL-12与Admax腺病毒包装系统的辅助质粒pBHGloxΔE1,3Cre共转染HEK293细胞后,构建出可调控的复制缺陷性重组腺病毒载体,用mIL-12引物对病毒进行鉴定;氯化铯密度梯度离心纯化病毒,最终稀释法测定其滴度.体外感染结肠癌C26细胞后,用ELISA法检测其基因调控表达.皮下注射C26大肠癌细胞构建小鼠大肠癌动物模型,将60只小鼠分成4个治疗组(Ad-缓冲液对照组、Ad-RUmIL-12对照组、Ad-RUmIL-12+RU486治疗组和Ad-mIL-12治疗组), 从各治疗组的肿瘤大小、病理及血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平等方面评价各组的治疗效果及不良反应.结果 经PCR鉴定证实可调控腺病毒载体Ad-RUmIL-12构建正确,纯化后病毒滴度达到4.62×1010空斑形成单位(pfu)/ml.病毒感染体外培养的C26细胞后,给予诱导剂RU486则最高可诱导表达mIL-12蛋白(516 ±43)pg/ml,而去除和不加入RU486时,只有少量的mIL-12蛋白表达[(38±3)pg/ml、(42±5)pg/ml].在小鼠动物模型上, Ad-RUmIL-12治疗组和Ad-缓冲液组肿瘤生长较快;Ad-RUmIL-12+RU486 治疗组和Ad-mIL-12治疗组对肿瘤生长有明显的抑制作用,病理检查显示两组肿瘤有较明显的坏死,而前组小鼠的血清ALT水平和不良反应发生率明显低于后组(4/15比10/15,P<0.05).结论 成功构建了可调控重组腺病毒 Ad-RUmIL-12,可以通过RU486诱导mIL-12蛋白的表达,并对大肠癌移植瘤有杀伤作用,明显提高了肿瘤基因治疗的安全性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方国恩	第二军医大学附属长海医院普通外科	132	928	17.0	25.0
2	刘绪舜	解放军第81医院普通外科	30	136	7.0	10.0
3	薛绪潮	第二军医大学附属长海医院普通外科	50	271	9.0	14.0
4	王峰	解放军第81医院普通外科	61	284	10.0	13.0
5	钱其军	东方肝胆医院病毒基因治疗实验室	13	49	4.0	6.0
6	陈坚	解放军第81医院普通外科	26	112	6.0	10.0
7	苏长青	东方肝胆医院病毒基因治疗实验室	6	11	3.0	3.0