利用压电生物传感器研究核因子NF-κB与其特异结合DNA的相互作用

• 作者: 府伟灵 张波 罗阳 蒋滢 闫慧慧
• 来源期刊: 分析测试学报
• 学科: 农学
• 关键词: 压电生物传感器 核因子NF-κB 脱氧核糖核酸 相互作用
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 385-388,393
• 页数: 5页
• 分类号: Q523|S951.4
• 字数: 3773字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-4957.2009.04.002

摘要

设计并合成了核因子NF-κB的特异结合DNA序列探针,在其5端巯基化修饰后固定在基频10 MHz的石英晶体金膜表面,构建压电DNA-蛋白质相互作用生物传感器,研究了传感器的响应特性及NF-κB的p65蛋白亚基与其特异DNA结合的亲和常数Ka.DNA探针浓度在0.25 ～2.0 μmol/L范围内,随着探针浓度的增加,传感器的响应频率逐渐增大,当探针浓度超过2.0 μmol/L时,传感器的响应频率反而降低;反应缓冲液镁离子浓度、pH对p65蛋白亚基与其特异DNA结合有影响,当MgCl2浓度为50 mmol/L、pH 7.5时,p65蛋白亚基与其特异DNA结合引起的传感器响应频率最大;在p65质量浓度为10 ～40 mg/L时,结合反应引起的频率变化与p65质量浓度呈线性相关,检测批内相对标准偏差(RSD)小于5%,批间RSD小于10%,最大结合量和结合常数Ka分别为(49.6±1.5) ng和(3.92±0.14)×106 L*mol-1.构建的压电DNA-蛋白质相互作用生物传感器具有结构简单、操作方便、不需标记、实时检测等优点,可直接用于核因子NF-κB与DNA的相互作用研究.