实时定量PCR快速检测对虾白斑综合症病毒

• 作者: 何俊强 凌宗帅 刘荭 岳志芹 张健 徐彪 梁成珠 毕道荣 赵巍 邓明俊 郑小龙
• 来源期刊: 山东农业大学学报(自然科学版)
• 学科: 农学
• 关键词: 实时定量PCR 白斑综合症病毒 对虾
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 页码范围: 54-58
• 页数: 5页
• 分类号: S945.4
• 字数: 2558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2324.2009.01.012

摘要

根据对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的保守序列,利用Primer Express2.0软件设计引物和Taqman探针,建立了WSSV的实时定量PCR检测体系.构建含有WSSV目的扩增片段的质粒为标准品,进行定量PCR扩增,结果表明标准品浓度在1.5×107～1.5×101个拷贝之间有"S"型扩增曲线,检测限为15个拷贝.标准曲线中模板浓度(X)与Ct值的关系为:Ct=-3.77 lgX+43.73,相关系数R2=0.9967.该检测方法特异性强,对传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、斑节对虾杆状病毒(MBV)、肝胰腺细小病毒(HPV)以及对虾基因组DNA没有扩增反应.运用该方法对100尾对虾样品进行检测,14个对虾样品为阳性.而运用巢式PCR检测只有4个对虾样品为阳性.实时定量PCR方法检测WSSV,快速、特异、灵敏,在虾病的临床检测上具有重要意义.