整合素αMβ2 I-结构域的基因合成和蛋白表达

• 作者: 侯晓敏 彭奇 袁彩 陈明晃 黄明东
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: αMβ2I-结构域 整合素 DNAWorks 肽指纹图谱
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 8-11
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3839字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.01.003

摘要

目的:利用大肠杆菌表达系统表达整合素αMβ2 I-结构域,并对其进行纯化.方法与结果:利用DNAWorks在线引物程序设计经过密码子优化的整合素αMβ2 I-结构域的寡核苷酸序列;采用PCR介导的基因拼装法合成αMβ2 I-结构域DNA模板,将其克隆至原核表达载体pET11d-6h上,并转化大肠杆菌,获得表达菌株;经IPTG诱导,αMβ2 I-结构域在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,表达产物经Ni-NTA琼脂糖层析柱纯化后,纯度达到90%以上;电喷雾电离质谱测定表明纯化所得的蛋白精确的相对分子质量为23 720.0,与预期值相符;肽指纹质谱图谱鉴定其为目的蛋白.结论:αMβ2 I-结构域的高效表达,为进一步研究其与配体的结合及其复合物晶体结构奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈明晃	中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室	17	132	8.0	11.0
2	彭奇	中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室	11	36	4.0	5.0