2型猪链球菌中国强毒株05ZYH33 ofs N-片段基因敲除株的构建

• 作者: 史沛举 唐家琪 潘秀珍 王晶 王长军 葛俊超 郝喜娜
• 来源期刊: 南京师大学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 2型猪链球菌 ofs 基因敲除株
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 87-92
• 页数: 6页
• 分类号: R378.1+2
• 字数: 3286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-4616.2009.02.019

摘要

通过生物信息学分析2型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2, S. suis 2)中国强毒株05ZYH33的基因组,预测并发现猪链球菌血清浑浊因子(Opacity factor of S. suis,OFS)的编码基因ofs.为了构建ofs N-末端片段ofs37-683的基因敲除株,首先构建中间为壮观霉素抗性基因,两侧为ofs37-683上、下游同源序列的基因敲除质粒,并对该质粒进行PCR和酶切鉴定.根据同源重组的原理,通过电转化方法筛选得到ofs37-683基因敲除株.PCR、测序和RT-PCR分析结果均显示ofs37-683已完全被壮观霉素抗性基因替代,证实ofs37-683基因敲除株构建成功.该敲除株的获得为进一步研究ofs在猪链球菌2型致病机制中的作用奠定基础.