藏鸡微卫星文库的构建与微卫星标记筛选

• 作者: 于颖 张斌 徐亚欧 杨孔 江晓霞 王永 郑玉才 陈智华
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 生物学
• 关键词: 藏鸡 微卫星 富集文库 筛选
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 358-362
• 页数: 5页
• 分类号: Q959.7|Q347
• 字数: 4269字
• 语种: 中文

摘要

通过磁珠富集法构建了藏鸡基因组微卫星富集文库,分离微卫星序列并对其进行分析.将藏鸡基因组DNA经Sau3AI酶切后纯化回收,连接特定接头.用生物素标记的(CA)12探针与藏鸡基因组酶切回收片段杂交,捕获200～900 bp片段,随后将获得的片段连接到pMD 18-T载体上,转化至JM109中,成功构建藏鸡微卫星富集文库.从1200个转化子中获得了353个阳性克隆,随机挑选53个测序,根据测序结果成功设计了18对藏鸡微卫星引物,最终筛选出6个具有多态性的微卫星标记,其PIC值均大于0.5,同时可以用于研究藏鸡遗传多样性.实验结果表明磁珠富集法能够有效提高分离微卫星标记的效率.