小鼠肝星状细胞的分离、培养及鉴定方法

• 作者: 周光文 张强 张正筠 李宏为 杨军 苏畅 陈曦 韦瑶
• 来源期刊: 外科理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 肝星状细胞 细胞分离 原代培养 小鼠
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 46-48
• 页数: 3页
• 分类号: R657.3/617
• 字数: 3018字
• 语种: 中文

摘要

目的:探索BALB/c小鼠肝星状细胞(HSCs)分离、纯化的可行方案,并评价依该法分离所得HSCs的生物学特性.方法:经肝门静脉先用不含钙镁离子的Hank液充分灌洗,再以浓度为1 mg/mL的Ⅳ型胶原酶灌注BALB/c小鼠肝脏.取肝后.完整分离后碾碎,37℃水浴振荡30 min,Percoll连续密度梯度(60%)离心法分离、纯化HSCs,苔盼蓝染色检测HSCs活性,结蛋白免疫细胞化学鉴定HSCs,光镜观察体外培养HSCs的形态学变化.结果:纯化后每只小鼠HSCs收获量约为(5.5±0.4)×105个,HSCs纯度＞90%.HSCs细胞活率＞90%.结论:本实验建立的的分离纯化方案可获得高纯度高活率的小鼠HSCs.