基于纳米金组合电极的HIV p24微流控安培免疫传感芯片研究

• 作者: 干宁 李天华 李榕生 杨欣 陈亚东
• 来源期刊: 传感技术学报
• 学科: 化学
• 关键词: 纳米金组合电极 方波溶出伏安法 微流控 HIV-p24 安培免疫传感芯片
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 生物化学类传感器
• 页码范围: 165-170
• 页数: 6页
• 分类号: O657.1
• 字数: 4730字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1699.2009.02.004

摘要

研制了以聚碳酸酯(PC)为基底,以表面修饰了人免疫缺陷病毒(HIV)核心抗原p24单克隆一级抗体(Rp24 Ⅰ)的纳米金组合电极(GNEE)为工作电极的微流控安培免疫传感芯片,并应用于p24抗原(简称p24)实时分析.检测原理是基于夹心免疫分析法,在电压驱动和流动条件下,一次性加入p24样品和纳米金胶标记的p24二级抗体(Rp24 Ⅱ-Au,金胶直径为50～100 nm)溶液.利用不同物质因受电场影响而在微管道中的迁移速率不同,使得p24抗原和Rp24 Ⅱ-Au依次到达GNEE电极,与其表面的Rp24 Ⅰ生成三明治型免疫复合物(Rp24 Ⅰ/p24/Rp24 Ⅱ-Au).接着以方波溶出伏安法(SWSV)将复合物上的金胶粒子溶出,由于溶出电流大小与被测定p24呈正比关系,从而获得p24的测定校正曲线.在pH 6.2的磷酸缓冲液(PBS)中p24检测时间小于2 min,线性范围为1～500 ng/L(R2=0.9975),检测限为0.25 ng/L.该芯片集成了加样、分离和检测系统.简化了分析步骤,缩短了检测时间,灵敏度达1μA·ng-1·mL,明显高于传统酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对艾滋病的早期诊断和大范围筛查具有应用价值.