第二代抗草甘膦大豆PCR检测方法研究

• 作者: 刘娜 宋新元 康岭生 张明 李葱葱 李飞武 邢珍娟 邵改革
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因生物 Roundup RReady2YieldTM 转化体特异性PCR
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 分析加工
• 页码范围: 296-300
• 页数: 5页
• 分类号: S565.1
• 字数: 4258字
• 语种: 中文

摘要

为建立转基因大豆Roundup RReady2Yield"(RR2Y)转化体特异性定性PCR检测方法,以lectin基因作为内参照基因,根据RR2Y外源插入片段5'端与植物基因组连接区序列设计特异性引物,从RR2Y中特异性地扩增出223bp的预期产物.对该方法进行重现性、特异性、灵敏度、稳定性和可重复性测试,结果显示:陔方法能够特异性检测出RR2Y转化体;将100%RR2Y基因组DNA用A3244基因组DNA进行梯度稀释,以100 ng DNA为模板,该方法的检测灵敏度达到0.05%,约为40个起始模板拷贝;以RR2Y DNA含量为10%、1%、0.1%的样品为模板,进行稳定性和可重复性,假阴性率为0.结果表明:此方法适用于RR2Y的转化体特异性定性PCR检测.