转基因家蚕丝腺组织和转化家蚕培养细胞表达hIGF-Ⅰ

• 作者: 曹广力 李曦 薛仁宇 贡成良 赵越
• 来源期刊: 中国科学C辑
• 关键词: ptggyBac 转化家蚕细胞 转基因家蚕 胰岛素样生长因子
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 677-684
• 页数: 8页
• 语种: 中文

摘要

为实现在家蚕培养细胞和家蚕丝腺组织中表达人胰岛素样生长因子(hIGF-Ⅰ)基因,以家蚕丝胶基因启动子(Pser-1)驱动hIGF-Ⅰ,基因,构建了带有家蚕杆状病毒ie-1启动子(PPie-1)控制的neo基因表达盒的转基因载体pigA3GFP-hIGF-ie-neo.在可表达转座酶的辅助质粒存在下,分别转染BmN培养细胞,以700-800μg/mL的G418筛选,获得了稳定转化细胞系.Western blotting分析可检测到hIGF-Ⅰ的特异性条带,ELISA检测结果显示,hIGF-Ⅰ在5×105个细胞中的表达水平约7800 pg.通过反向PCR分析表明,在转化细胞中外源DNA可通过随机整合或按照piggyBac特定的靶位点序列TTAA插入细胞基因组.转基因载体pigA3GFP-hIGF-ie-neo通过精子介导法导入蚕卵,利用neo,gfp基因的双重筛选,经过PCR和点杂交鉴定,获得了2头转基因家蚕.ELISA检测结果显示,在G1代hIGF-Ⅰ在每克中部丝腺组织中的表达水平为2440 pg左右.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛仁宇		110	944	17.0	24.0
2	贡成良		136	1227	19.0	27.0
3	曹广力		136	1198	19.0	28.0
4	赵越		4	23	2.0	4.0
5	李曦		3	19	1.0	3.0