SARS冠状病毒S蛋白基因片段的表达及其单克隆抗体的制备

• 作者: 夏梅 张建琼 缪凤琴 谢维 鲍海逊
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 严重急性呼吸综合征 SARS冠状病毒 S蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2009.01.006

摘要

目的: 表达SARS冠状病毒S蛋白片段,并制备特异性单克隆抗体(mAb).方法: 原核表达SARS冠状病毒S蛋白片段,从SARS病毒cDNA中扩增S蛋白(N端205至419aa)基因片段,测序结果正确.将该基因片段插入pQE-30中,构建重组质粒pQE-30-S1m,以重组质粒转化E.coli M15诱导表达His-S1m蛋白.纯化后免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性mAb.结果: 表达并纯化了重组蛋白His-S1m,获得1株抗His-S蛋白的mAb1H2.Ig亚类鉴定为IgG1a,轻链为κ型.经Western blotting检测,mAb1H2与S蛋白发生特异性反应,而与His蛋白无交叉反应.结论: 成功表达了重组S蛋白并制备了特异性mAb,为SARS-CoV的早期诊断及进一步研究S蛋白的功能奠定了基础.