富含多糖的转基因石斛基因组DNA提取方法

• 作者: 张妙彬 潘丽晶 程萍 范干群 陈继敏
• 来源期刊: 分子植物育种
• 学科: 农学
• 关键词: 石斛兰 DNA提取 多糖 PCR Southern杂交
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 新思路、新技术、新方法
• 页码范围: 209-214
• 页数: 6页
• 分类号: S6
• 字数: 2012字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-416X.2009.01.035

摘要

在石斛兰转基因研究中,需通过PCR和Southern杂交等手段检测外源基因是否转入并整合到转化植株基因组.由于转化石斛植株生长缓慢,且含有多糖,因此从转化植株中提取高质量的基因组DNA以尽快对转基因苗进行分子检测存在较大困难.本研究旨在通过改良现有的DNA提取法(CTAB法或SDS法1,克服转化石斛植株基因组DNA提取中碰到的产量低,纯度不高而导致难以进行PCR或酶切等问题.在本研究所用的3种改良法中,方法Ⅱ能从少量的转化石斛苗中提取出高产量和高纯度的基因组DNA.研究结果表明方法Ⅱ提取的基因组DNA完全适用于转基因石斛的外源基因PCR扩增,限制性酶切和Southern杂交分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程萍		40	571	14.0	22.0
2	陈继敏		14	101	6.0	9.0
3	潘丽晶		19	171	8.0	12.0
4	张妙彬		14	141	7.0	11.0
5	范干群		7	120	6.0	7.0