表皮生长因子受体干扰序列与白细胞介素24融合蛋白的原核表达

• 作者: 刘翊 包乐媛 朱婧 杜连祥 樊欣迎
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 白细胞介素24 表皮生长因子受体干扰序列 融合蛋白 原核表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 43-46
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3042字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2009.01.013

摘要

目的:在大肠杆菌中表达表皮生长因子受体干扰序列(EGFRi)与白细胞介素24(IL-24)的融合蛋白.方法:人工合成肿瘤细胞表面受体特异性结合位点EGFRi核苷酸序列,应用重叠延伸PCR技术将其与IL-24基因连接,其间引入一段柔软短肽编码基因;将融合基因克隆入pET-22b原核表达载体,IPTG诱导融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达条件进行优化;用His·Bind纯化试剂盒对表达产物进行纯化,SDS-PAGE进行鉴定.结果:酶切和测序结果证实EGFRi-IL-24融合基因的原核表达载体构建正确;在IPTG浓度为0.8 mol/L、280C诱导10 h的条件下,可溶性融合蛋白表达量最高;表达产物的相对分子质量与预期值一致,为22 000;经纯化得到了均一的融合蛋白.结论:获得大肠杆菌表达的融合蛋白EGFRi-IL-2,可用于活性分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	樊欣迎		4	8	2.0	2.0
2	包乐媛		1	0	0.0	0.0
3	朱婧		4	10	2.0	3.0
4	刘翊		3	6	2.0	2.0
5	杜连祥		29	162	8.0	9.0