巴曲酶在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 兰海英 徐梅 王宏英 薛百忠 薛雁
• 来源期刊: 蛇志
• 学科: 医学
• 关键词: 重组巴曲酶 类凝血酶 巴斯德毕赤酵母 偏好密码子
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: R977.3
• 字数: 4461字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5639.2009.01.001

摘要

目的 研究巴曲酶在毕赤酵母菌中的表达.方法 按Pichia pastoris偏好密码子人工合成巴曲酶全基因,克隆到酵母分泌型表达载体pPICZαA中,将重组载体酶切线性化后经电转化转入X-33,筛选鉴定转化子,经摇瓶发酵甲醇诱导,酵母菌分泌表达有凝血活性的巴曲酶.经SDS-PAGE电泳确定其分子量为33.0 kDa,免疫印迹证明重组巴曲酶具有天然巴曲酶的免疫活性.结果 经发酵条件的优化,发酵罐的表达量达到25000 Ku/L发酵液,从每升发酵液中可纯化出11.0 mg重组巴曲酶.结论 巴曲酶毕氏酵母菌成功的构建,为重组巴曲酶止血药的开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛雁		5	47	3.0	5.0
5	徐梅		9	28	4.0	4.0
6	薛百忠		8	28	4.0	5.0
7	王宏英		17	53	5.0	6.0
8	兰海英		3	19	3.0	3.0