肺动脉平滑肌细胞钾电流记录方法的建立

• 作者: 余细勇 单志新 吴书林 杨敏 林曙光 林秋雄 耿庆山 邓春玉 邝素娟 钱卫民
• 来源期刊: 岭南心血管病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肺动脉 肌细胞,平滑肌 钾 钙
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 318-321
• 页数: 4页
• 分类号: R543.2
• 字数: 3459字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9688.2009.04.021

摘要

目的 在肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)上建立钙离子激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)电流、电压门控钾通道(voltage-gated potassium channel,Ky)电流和内向整流钾通道(Inward rectifier channel,Ku)电流的记录方法 .方法 用急性酶解的方法 分离出单个大鼠PASMC,利用全细胞膜片钳方法 记录钾电流.结果 ①急性酶解分离得到高质量的单个大鼠PASMC,呈梭形,边界清楚,胞浆均匀透亮.②Kv电流可以被5 mmol/L4-AP明显抑制,使电流-电压关系曲线明显下移,在55 mV时,Kv电流密度从(133.86±7.36)pA/pF减少到(59.09±3.35)pA/pF(n=6,P<0.05).③1 mmol/L TEA对KCa电流有明显抑制作用,使电流-电压关系曲线明显下移,在55 mV时,KCa电流密度从(9.03±1.42)pA/pF减少到(2.12±0.52)pA/pF(n=7,P<0.05).④KATP电流可以被10 μmol/L尼可地尔激活,使电流-电压关系曲线明显上移,在50 mV时,Kv电流密度从(29.08±5.90)pA/pF增加到(88.90±7.98)pA/pF(n=10,P<0.05).结论 在肺动脉平滑肌细胞上成功地建立了KCa、Kv和Kir电流的记录方法 ,可以为肺动脉相关疾病的发病机制和治疗方案的探索,提供有效的细胞模型基础.