梯度离心法制备鸡肝微粒体方法的建立

• 作者: 吴大成 李晓芳 杨丽丽 程义勇 胡红芳 高志贤
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 肝微粒体 梯度离心 细胞色素P450
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 526-527,556
• 页数: 3页
• 分类号: Q485
• 语种: 中文

摘要

目的:建立梯度离心法制备鸡肝微粒体的方法.方法:利用蔗糖密度梯度离心法制备鸡肝微粒体,经透射电镜和Western-blot检测肝微粒体纯度,BCA法检测总蛋白质含量,CO差示光谱法检测总CYP450含量.结果:电镜下,制备的肝微粒体可清楚见到大量膜囊泡状结构,其它污染细胞器成分较少见;制备的肝微粒体仅与GRP94抗体特异性结合;肝微粒体总蛋白质含量与总CYP450含量分别为8.749 mg/mL和0.763 nmol/mg.结论:利用蔗糖梯度密度离心法制备得到高质量鸡肝微粒体蛋白,为鸡细胞色素P450的深入研究奠定了基础.