一种高效提取焦化废水活性污泥总DNA的方法

• 来源期刊: 环境科学学报
• 学科: 地球科学
• 关键词: 焦化废水 活性污泥 DNA提取 PCR扩增
• 年，卷（期）: 2009,（11）
• 所属期刊栏目: 污染控制技术及原理
• 页码范围: 2318-2323
• 页数: 6页
• 分类号: X703
• 语种: 中文

摘要

对焦化废水活性污泥中微生物建立高质量的总DNA提取方法是开展分子生态学研究的重要前提.通过反复冻融一蛋白酶K-SDS、溶菌酶-反复冻融-SDS及溶菌酶-反复冻融-蛋白酶K-SDS这3种综合方法对焦化废水活性污泥总DNA进行提取,以OD_(260)/OD_(280)、OD_(260)/OD_(230)、产率、片段完整性、片段大小5个指标来评价样品总DNA的提取效果.结果表明,溶菌酶-反复冻融-蛋白酶K-SDS法所提取的总DNA的OD_(260)/OD_(280)值约为1.8,产率为1.90-16.30μg·g~(-1),片断完整性好,主带清晰,大小约为23 kb,其PCR反应抑制物少.能够直接进行16S rRNA基因的PCR扩增.溶菌酶-反复冻融-蛋白酶K-SDS法能够为焦化废水活性污泥中微生物的分子生态学研究提供高质量的总DNA.