腺病毒介导人内皮抑素感染视网膜色素上皮细胞的可行性研究

• 作者: 严密 吴静 张军军 张美霞 辛梅 闫乃红
• 来源期刊: 眼视光学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 视网膜色素 上皮细胞 腺病毒 内皮抑素类 感染
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 265-268
• 页数: 4页
• 分类号: R773.4|R392.11
• 字数: 3387字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1674-845X.2009.04.008

摘要

目的 探讨以腺病毒为载体对体外培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelial,hRPE)细胞进行人内皮抑素(human endostatin,hES)感染,获得高效表达hES转基因细胞的可行性.方法 常规培养hRPE细胞,传代至第3～第5代后,应用携带有绿色荧光蛋白(green fluores-cent protein,GFP)的hES重组腺病毒按感染复数30进行感染.培养24 h后,在荧光显微镜下计数培养的hRPE细胞的GFP表达阳性率;用免疫组织化学法观察hES在已感染hRPE细胞中的表达情况;提取hRPE细胞总RNA,采用RT-PCR技术对产物行琼脂糖凝胶电泳;用Western blot法检测感染hRPE细胞培养上清液中hES的表达水平.结果 hES重组腺病毒感染后,hRPE细胞形态正常.感染后24 h,GFP即呈100%表达,弥漫整个胞质;免疫组织化学法观察可见,hRPE细胞浆内呈棕黄色的阳性反应,而在感染空载腺病毒的对照组中细胞胞浆无染色;RT-PCR反应可见,细胞裂解产物中有hES阳性条带;Western blot法检测结果 表明,培养上清液中有hES蛋白的表达.结论 hES重组腺病毒载体能有效感染体外培养的hRPE细胞,并稳定表达hES蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张美霞	四川大学华西医院眼科	57	213	7.0	12.0
2	张军军	四川大学华西医院眼科	81	283	9.0	12.0
3	严密	四川大学华西医院眼科	37	285	8.0	15.0
4	吴静	四川大学华西医院眼科	32	104	7.0	9.0
5	闫乃红	四川大学华西医院眼科	21	139	7.0	11.0
6	辛梅	四川大学华西医院眼科	5	16	2.0	3.0