3种方法制备的siRNA在RNAi中的初步比较

• 作者: 吴美华 朱远源 李谦 陆毅祥 陈雅晴 龚庭敬
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 小干扰RNA 制备方法 沉默效率
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 306-310
• 页数: 5页
• 分类号: Q7
• 语种: 中文

摘要

为初步比较化学合成法,载体表达法,表达框法制备的siRNA在RNAi中的沉默效率,先构建表达质粒Lamin-siRNA-pFIV和制备lamin-siRNA表达框,然后将3种彤式的siRNA转染到Hela细胞,通过qRT-PCR与Western Blotting法比较3种方法制备的siRNA在转染48 h后,LamirtA/C基因沉默效果.结果显示化学合成法制备的siRNA沉默效率65%,表达框法制备的siRNA沉默效率20%,质粒载体表达法没有表现出沉默效果.因此说在转染48 h后,化学合成法制备的siRNA沉默效率最好,其次是表达框法制备的siRNA,质粒载体表达法未表现出沉默效果,需继续优化转染条件.