乳牛乳腺炎病原菌的质粒提取及其四环素耐药基因的扩增

• 作者: 代敏 彭成 杨丽红 王利 王雄清 陈希文
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 质粒提取 聚合酶链式反应 四环素耐药基因 乳腺炎病原菌 乳牛
• 年，卷（期）: 2009,（4）
• 所属期刊栏目: 药物学
• 页码范围: 366-371
• 页数: 6页
• 分类号: S857.26|Q503
• 字数: 5567字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.04.017

摘要

采用碱裂解法、改良碱裂解法、大质粒简易提取法、试剂盒法和SDS法共5种方法对分离于绵阳市奶牛场的乳腺炎病原菌共50株进行了质粒DNA的提取,并用琼脂糖凝胶电泳对提取质粒进行了电泳分析.结果表明,5种质粒提取方法中SDS法的提取率较高(88%),电泳检测时质粒条带清晰,绝大部分菌株含有大小约20 kb的一种质粒;其他4种方法的提取率都较低,且以弥散性质粒条带为主.以提取的质粒DNA为模板,对其四环素耐药基因tetM、tetK和tetC进行了PCR扩增.结果表明,仅4株扩增出了tetM基因的特异性产物,未能扩增出tetK基因和tetC基因.