白念珠菌抗氧化基因体外表达研究

• 作者: 余进 周汝真 李若瑜
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白念珠菌 氧化压力反应 体外 基因表达 反转录实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 325-329,342
• 页数: 6页
• 分类号: R379.4
• 字数: 4051字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-3827.2009.06.002

摘要

目的 检测白念珠菌体外抗氧化及调节转录的基因表达情况,进一步了解白念珠菌抗氧化机制在体外生长状态下的作用.方法 选取白念珠菌标准株sc5314、3株临床分离保存株及7例临床念珠菌性阴道炎分泌物分离株(白念珠菌),接种培养鉴定为白念珠菌后,分别将体外SDB振荡培养2h、6h、24h、72h、120d的菌液(含未培养0h).用Trizol法提取总RNA,反转录为cDNA后进行实时荧光定量PCR,检测体外各时间点抗氧化基因及抗氧化转录因子的基因表达情况,运用Ct值比较法进行表达量的相对定量分析.结果 与0h相比,体外6h SOD2表达增加7.47倍,经Wilcoxon配对符号秩和检验显示P值小于0.01,差异具有统计学意义.其他各基因2h及6h分别与0h相比P值均＞0.01,其表达差异不具有统计学意义.体外培养1 d后各基因表达明显增加,CaHog1、CAP1、CAT及SOD5在第3天达最高,分别为24.23、3.34、33.64及14.72倍;SOD2在第1天达最高为68.95倍;CaSkn7在第5天达最高为7.21倍.经Wilcoxon配对符号秩和检验显示SOD5第1天P值为0.013,其余基因表达P均＜0.01,表达差异具有统计学意义.结论 当外界营养逐渐耗竭时,白念珠菌会动态加强抗氧化基因的表达,以抵抗机体内、外产生的氧化压力,其中SOD2可能是最早增加表达的抗氧化基因,3条抗氧化感受通路的转录调节基因均有增加表达,提示3条抗氧化感受通路在适应体外营养限制过程中起了重要作用.