生物素化ATP硫酸化酶的表达、固定化与应用

• 作者: 周国华 武海萍 罗娟 邹秉杰
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 生物学
• 关键词: ATP硫酸化酶 生物素化 固定化 焦测序
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 923-928
• 页数: 6页
• 分类号: Q7|Q81
• 字数: 4095字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1206.2008.00719

摘要

现代大规模焦测序技术的产生是DNA测序技术的一次革命,其关键技术之一是得到高活性的、固定于磁性微球表面的ATP硫酸化酶.生物素化的ATP硫酸化酶可以通过生物素与亲和素之间的特异结合特性固定在包被亲和素的磁性微球表面,但是利用化学修饰法将ATP硫酸化酶进行生物素化修饰很可能会影响酶的活性.利用融介表达策略,将大肠杆菌生物素酰基载体蛋白C端87个氨基酸肽段(BCCP87)与ATP硫酸化酶在大肠杆菌内融合表达,经SDS-PAGE和Western blot分析,表达的融合蛋白分子质量约为64 ku,并儿能够在大肠杆菌内被生物素化.生物素化的ATP硫酸化酶能够与亲和素包被的磁珠结合,固定后的ATP硫酸化酶具有活性,并且能够用于定量检测焦磷酸盐(PPi)和焦测序,为今后建立高通量大规模焦测序系统提供一个有效的工具酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周国华		35	628	10.0	24.0
3	武海萍		10	105	6.0	10.0
4	邹秉杰		7	43	4.0	6.0
8	罗娟		2	15	2.0	2.0