基于M13噬菌体展示单链抗体文库的新型蛋白质均衡器的研制及其在肾病患者尿蛋白分析中的应用

• 作者: 张丽华 张玉奎 梁振 赵鹏 陶定银
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 蛋白质均衡器 M13噬菌体展示单链抗体文库 串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱 蛋白质 肾病患者 尿
• 年，卷（期）: 2009,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 249-253
• 页数: 5页
• 分类号: O658
• 字数: 3891字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-8713.2009.03.001

摘要

通过将展示单链抗体(scFv)文库的M13噬菌体固定于冷凝胶整体柱表面制备了一种新型蛋白质均衡器.由于展示的scFv片段具有种类多、数目大以及与蛋白质结合的特异性强等优点,因此其非常适合用于复杂蛋白质样品的预处理.将肾病患者尿蛋白在平衡器上反复上样5次后,依次使用2 mol/L NaCl、50 mmol/L Gly-HCl(pH 2.5)和凝血酶溶液洗脱与均衡器结合的蛋白质,收集各馏分,并采用串联微柱反相液相色谱-电喷雾质谱进行蛋白质的分离鉴定.与未经均衡器处理的样品相比,鉴定的蛋白质数目由142个提高到396个.此外,凝胶电泳的分析结果显示,在上样流出液中蛋白质的浓度差异明显变小,大量的高丰度蛋白质存在于NaCl洗脱液中.上述结果表明,基于M13噬菌体展示scFv文库的新型蛋白质均衡器能够有效减小样品中蛋白质的浓度差异,有利于发现更多的低丰度蛋白质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张玉奎	中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室	154	1375	20.0	30.0
2	赵鹏	中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室	62	531	10.0	21.0
3	张丽华	中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室	85	1579	21.0	39.0
4	梁振	中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室	25	123	7.0	10.0
5	陶定银	中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室	3	6	1.0	2.0