鹅细小病毒和鸭瘟病毒复合PCR检测方法的建立

• 作者: 文心田 曹三杰 鲜思美 黄小波
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅细小病毒 鸭瘟病毒 复合PCR 检测
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 58-63
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.2|S852.659.1
• 字数: 5164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2009.01.012

摘要

根据GenBank中的鹅细小病毒(GPV)和鸭瘟病毒(DPV)基因序列,分别设计合成了针对GPVVP3和DPV UL6基因片段的2对引物,以GPV-GZ1株鹅胚尿囊液和DPV-SD株鸭胚尿囊液的核酸提取物混合液作为模板,经优化反应条件,成功建立了检测GPV和DPV 2种病毒的复合PCR方法.特异性试验结果显示,该方法对GPV-GZ2株与DPV-SC株病毒核酸的扩增均获得550 bp和376 bp的2条特异性目的片段,而对鹅副黏病毒、鸭肝炎病毒、鸭源沙门菌、鸭源巴氏杆菌和鸭疫里默氏杆菌的核酸扩增结果均为阴性;敏感性试验结果显示,该方法对GPV核酸的最小检出量为1.66 Pg,对DPV核酸为0.166 Pg;对人工感染雏鹅的肝组织进行PCR扩增,结果可检测到相应的特异性病毒核酸片段.表明,建立的复合PCR方法具有特异性强、敏感性高、快速简便等特点,可用于GPV或/和DPV临床感染病例的联合检测与鉴别诊断.